* Green Goblin (Norman Osborn) :Toto je hlavný záporák a dá sa hrať od začiatku.
* Nový Goblin (Harry Osborn) :Harryho odomknete ako hrateľnú postavu dokončením príbehového režimu hry.
V hre nie sú žiadni ďalší hrateľní škriatkovia.
Je dôležité poznamenať, že Spider-Man 3 (2007) je hra pre jedného hráča . Neexistujú žiadne režimy pre viacerých hráčov, kde by ste mohli odomknúť nové postavy.