Hlavné postavy:
* Sherlock Holmes: Brilantný detektív, známy pre svoje deduktívne uvažovanie a pozorovacie schopnosti.
* Dr. John H. Watson: Holmesov verný priateľ a kronikár, ktorý často slúži ako hľadisko čitateľa.
* Mary Morstan: Mladá žena hľadá informácie o zmiznutí svojho otca a záhadnom „Znamení štyroch“, ktoré dostane.
* Jonathan Small: Zlý, no v konečnom dôsledku tragický strojca za krádežou pokladu Agra a „Znamenia štyroch“.
* Thaddeus Sholto: Bývalý partner Jonathana Smalla v zločine, ktorý zdedí časť pokladu Agra. Pred začiatkom príbehu je zavraždený.
* Athelney Jones: Detektív Scotland Yardu, ktorého Holmes často vysmieval pre jeho príliš metodický a menej intuitívny prístup.
Ďalšie dôležité znaky:
* Pani Hudson: Majiteľka 221B Baker Street, kde bývajú Holmes a Watson.
* Kmeň Tonga: Skupina domorodcov z Andamanských ostrovov, lojálnych Jonathanovi Smallovi a zvykla realizovať jeho plány.
* Znamenie štyroch: Názov dostal štyri jedinečné predmety:strieborný špendlík, malá zdobená krabička, kúsok olovenej fajky a obojok pre psa. Tieto predmety sú spojené s krádežou pokladu Agra.
Pomocné postavy:
* Bartolomej Sholto: Tadeášov brat, ktorý zdedí časť pokladu Agra a stane sa cieľom Jonathana Smalla.
* Pani Sholto: Tadeáša a Bartolomejova matka, ktorá má obavy o ich bezpečnosť.
* Pani Morstan (Máriina matka): Žena, ktorá bola kedysi zamilovaná do Thaddeusa Sholta a ktorá zomrela za záhadných okolností.
* Inšpektor Bradstreet: Inšpektor Scotland Yardu, ktorý spolupracuje s Athelney Jones.
Je dôležité si uvedomiť, že zatiaľ čo sa príbeh primárne zameriava na hlavné postavy, mnohé vedľajšie postavy dodávajú zápletke vrstvy a prispievajú k celkovej atmosfére románu.