Kto by mohol hrať v glóbusovom divadle?

V divadle Globe smeli vystupovať len mužskí herci. V tom čase nebolo spoločensky akceptovateľné, aby ženy vystupovali na javisku, a tak všetky ženské úlohy hrali mladí chlapci alebo muži. Táto prax bola bežná v alžbetínskom divadle a pokračovala až do obdobia reštaurovania na konci 17. storočia.